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吴宏举,李 潮,郑南南,侯浩宇,陈寅龙,靳家鑫,孙爱军,杜永坤∗,张改平∗(河南农业大学 动物医学院国家动物免疫学世界联合研讨中心,郑州 450046)
梁太润,熊谋康,王爽云,张歆明,王志朋,王 磊,刘献辉,于林洋,刘燕玲,张乐宜,宋长绪∗(华南农业大学 动物科学学院国家生猪种业工程技能研讨中心,广州 510642)
摘 要:为了在 Sf9 昆虫细胞中表达猪圆环病毒 2 型(PCV-2)Rep 蛋白,实验以 PCV-2 毒株(PCV2b)的 DNA 为模板扩增 ORF1 基因,将 ORF1 基因刺进到搬运载体质粒 pQB3s 上,构建重组质粒pQB3s-PCV-2b-Rep,将重组质粒与杆状病毒表达载体 qBac-ⅢG 一起转染 Sf9 昆虫细胞,取得 P0 代重组杆状病毒,经接连传代取得 P1、P2、P3 代重组杆状病毒,将 P3 代重组杆状病毒接种到 Sf9 昆虫细胞中进行悬浮培育,搜集细胞并运用镍柱纯化重组表达的蛋白,经过荧光显微镜查询感染重组杆状病毒的 Sf9 昆虫细胞中的荧光量,经过 SDS-PAGE 剖析和 Western-blot 判定重组蛋白的表达情况。成果表明:经 PCR 判定在 945 bp 处呈现特异性条带;经过荧光显微镜查询,在转染后第 1 天就呈现绿色荧光,第 4~5 天呈现很多绿色荧光,P2、P3 代重组杆状病毒感染 Sf9 昆虫细胞及 P3 代重组杆状病毒感染悬浮培育的 Sf9 昆虫细胞后在第 4~5 天呈现很多绿色荧光;P2、P3 代重组杆状病毒感染的 Sf9昆虫细胞的细胞裂解液及纯化的重组 Rep 蛋白,经过 SDS-PAGE 剖析和 Western-blot 判定在约 38 ku处呈现意图条带。阐明实验成功构建出重组质粒 pQB3s-PCV-2b-Rep 及重组杆状病毒,构建的重组杆状病毒能够在悬浮培育的 Sf9 昆虫细胞中表达重组蛋白 Rep。
要害词:猪圆环病毒 2 型;重组蛋白 Rep;Sf9 昆虫细胞;杆状病毒表达载体;纯化
臭参水提物经过 miR-3081-3p 及靶基因 Ubn2对小鼠结肠癌的调控研讨
丁玥竹1,任 宇1,郭爱伟1,吴培福1,周杰珑1,杨亚晋1,陈粉粉1,李青青1,栾云鹏2,刘莉莉1∗(1. 西南林业大学 生命科学学院,昆明 650224;2. 西南林业大学 绿色开展学院,昆明 650224)
摘 要:为了探求臭参水提物经过 miRNA 对小鼠结肠癌的调控作用,实验首要选用高通量测序技能测定结肠癌模型小鼠的结肠安排中 miRNA 表达水平,经过 GO 注释剖析和 KEGG 富集剖析对差异表达 miRNA 进行功用猜测,以挑选出的表达差异较显着且尚无相关报导的 miR-3081-3p 为研讨目标并猜测其靶基因;然后在 NIH-3T3 细胞中转染 miR-3081-3p 模仿物(mimics)并增加臭参水提物进行孵育,经过 Western-blot 检测其靶基因的表达水平,并运用流式细胞仪检测细胞凋亡率。成果表明:在结肠癌模型小鼠的结肠安排发现 117 个显着差异表达的 miRNA,其靶基因首要富集在肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、Ras、泛素化及 NF-κB 等信号通路中;其间 miR-3081-3p 在结肠癌模型小鼠中表达量显着下降 54%,其靶基因 Ubn2 表达量显着上升(P
要害词:臭参水提物;小鼠结肠癌模型;miR-3081-3p;Ubn2 基因;细胞凋亡;细胞增殖
江美祺,李振阳,李 新,胡德宝,郭益文,丁向彬,郭 宏,张林林∗(天津农学院 动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康饲养要点实验室,天津 300384)
摘 要:可变剪接(alternative splicing,AS)是由单个前体 mRNA 构成多个老练 mRNA 的进程,从同一基因产生多个转录本,增加转录组和蛋白质组的多样性,此进程是调理基因组表达和产生蛋白组多样性的重要机制。同种生物经可变剪接产生不同表型,在不改动基因序列的情况下调控蛋白质的生物学功用,关于了解生命活动的调控进程有重要意义。文章对可变剪接的产生机制及其在农业动物中的研讨进展进行了总述,以期为在农业动物中进一步研讨可变剪接奠定根底。
宋代玲,翁雅娟,特日格乐,王国庆,芒 来∗,李 蓓∗(内蒙古农业大学 动物科学学院内蒙古自治区马属动物遗传育种与繁衍学要点实验室,呼和浩特 010018)
摘 要:可变剪接作为一种进步基因组复杂性的机制,在调理基因功用多样性和表型变异中发挥着非常重要的作用。可变剪接事情的顺利进行能够调控并促进正常的生成,有利于动物的繁衍。文章要点介绍了可变剪接对哺乳动物生成的调控作用,并进行了总结展望,旨在为强化育种改进供给新的思路。
张太鹏1,2,秦玉圣2,白佳桦2,许晓玲2,杨 凌1,刘 彦2∗,张乐颖1∗(1. 河北工程大学 生命科学与食物工程学院,河北 邯郸 056038;2. 北京市农林科学院 畜牧兽医研讨所,北京 100097)
摘 要:Kisspeptin 是由 KISS1 基因编码的一种神经肽。Kisspeptin 与其受体是 GnRH 神经元上游的要害调理因子,经过调控 GnRH 开释影响垂体的排泄。Kisspeptin 在哺乳动物下丘脑、垂体和性腺等器官安排中表达,参加下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴功用调控,在哺乳动物生殖进程中发挥重要作用。文章首要从下丘脑、垂体和性腺三个方面论述 Kisspeptin 对哺乳动物生殖功用的调控作用,并就 Kisspeptin 在动物初情期发动、季节性繁衍和繁衍功能上的研讨进行剖析总结,以期为Kisspeptin 在动物繁衍范畴的研讨和运用供给参阅依据。
马继福,巴合提·博代,贾昊天,吾热力哈孜·哈孜汗∗(石河子大学 动物科技学院,新疆 石河子 832003)
摘 要:按捺素(inhibins)是一种首要由卵巢颗粒细胞和睾丸支撑细胞排泄的性腺激素,能够挑选性按捺垂体促卵泡素(FSH)的组成与排泄。文章总述了很多学者树立的按捺素对 FSH 的作用机制,以及该作用机制与近年来研讨成果的对立之处,并依据近年来的研讨成果批改了按捺素对 FSH 的作用机制模型,以期为将来研讨按捺素供给新的思路。
季久秀1,张春峰1,潘章源1,吕慎金1∗,张 震2∗(1. 临沂大学 农林科学学院,山东 临沂 276005;2. 桂林医学院 生物技能学院,广西 桂林 541199)
摘 要:为了探寻影响杜寒杂交羊体尺性状的遗传符号,实验经过 Multiplex SNaPshot 技能对 72 只6 月龄杜寒杂交羊的 HMGA1、HMGA2、PLAG1 和 BMPR1B 四个影响体型巨细的候选基因中的 20 个SNPs 位点进行了基因型分型,运用 PLINK v1. 07 软件对单核苷酸多态性(SNPs)位点与体尺性状(体斜长、体高和管围)进行单点相关剖析,运用 Excel 软件进行等位基因代替效应剖析,并运用 HaploView version 4. 2 软件进行单倍型构建及连锁不平衡剖析。成果表明:除 2 个 SNPs 位点外,其他 18 个SNPs 位点均存在骤变基因型。HMGA1 基因上游的 rs405972023 位点与体斜长和管围呈显着相关(P
滩寒杂交 F1 代 BMP15 和 GDF9 基因多态性及不同基因型对繁衍性状影响的研讨
摘 要: 为了研讨绵羊高繁衍力候选基因骨形状产生蛋白 15(bone morphogenetic protein 15, BMP15)基因和成长分解因子 9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因的多态性及不同基因型对滩寒杂交F1 代集体繁衍性状的影响,实验以搜集的 915 份滩寒杂交 F1 代集体血液样本为研讨目标,选用飞翔时刻质谱基因分型技能进行 SNP 位点分型和遗传多态性剖析,并运用 Sanger 测序技能进行验证,然后对不同基因型与滩寒杂交 F1 代集体繁衍性状和泌乳性状别离进行相关剖析。成果表明:BMP15和 GDF9 基因 SNP 位点在 915 份 DNA 样本中均呈会集聚类散布。滩寒杂交 F1 代集体 BMP15 和GDF9 基因均存在 AA、AB、BB 3 种基因型,其间 BMP15 基因在滩寒杂交 F1 代集体中的优势等位基因为 A 基因,基因型频率为 0. 69;GDF9 基因在滩寒杂交 F1 代集体中的优势等位基因为 A 基因,基因型频率为 0. 58。BMP15 和 GDF9 基因 SNP 位点在滩寒杂交 F1 代集体中均处于中度多态,GDF9 基因处于 Hardy-Weinberg 平衡情况(P>
0. 05)。BMP15 和 GDF9 基因 AA 基因型在滩寒杂交 F1 代集体中的产羔数均高于 AB 和 BB 基因型,其间 BMP15 基因 AA 和 BB 基因型第 2 胎次产羔数显着高于AB 基因型(P
要害词:滩寒杂交 F1 代集体;BMP15 基因;GDF9 基因;繁衍性状;相关剖析
秦学波1,张天浩1,葛丛丛1,冯东青1,刘华云1,巩元芳1∗,孙洪新2∗(1. 河北科技师范学院 动物科技学院河北省特征动物种子资源发掘与立异要点实验室,河北 秦皇岛 066004;2. 河北省畜牧兽医研讨所,河北 保定 071000)
摘 要:为了判定杜泊羊与湖羊杂交 F1 代和湖羊羔羊在河北省邢台区域的成长发育和身体情况,实验对二者从初生到断奶期间的成活情况、成长功能及断奶时的血液生理目标进行了比较剖析。成果表明:杜湖杂交 F1 代和湖羊羔羊从初生到断奶期间的成活率别离为 100%和 95%;体重的累积成长中,除了初生重外,杜湖杂交 F1 代公羔、母羔各年龄段的体重均高于湖羊,其间在 15 日龄时二者差异显着(P
摘 要:为进一步了解我国生猪工业开展的现状,探求不同饲养规划导致生猪饲养本钱与收益存在差异的原因,文章具体论述了我国现在生猪规划饲养的开展趋势及存在的问题,选用可行广义最小二乘法(FGLS 法)对选取的 2001—2020 年全国 31 个省份的面板数据进行计量剖析,依据贡献率挑选首要影响要素,针对不同饲养规划,从饲养技能、人工本钱、饲料收购价格、仔猪进价、生猪饲养环境、疫情冲击、粪污处理及政府补助几个方面对生猪规划饲养经济效益影响要素打开剖析,旨在为我国生猪饲养工业高质量开展供给参阅。
摘 要:为了探求赪桐潜在防治奶牛炎的作用机制,实验依据网络药理学,运用 TCMSP 数据库搜集赪桐潜在抗奶牛炎致病菌活性成分,在 GeneCards 数据库中搜集与奶牛炎致病菌相关的作用靶点。运用 Cytoscape 3. 8. 2 软件制作赪桐活性成分与致病菌靶点网络图,经过将挑选到的致病菌靶点导入 STRING 数据库构建致病菌靶点相互作用网络,终究运用 DAVID、Metascape 数据库对各靶点进行 GO 功用注释和 KEGG 富集剖析。成果表明:共得到赪桐潜在抗奶牛炎活性成分11 个,对应致病菌靶点 86 个;共得到 97 个节点,174 条相互作用联系;去除游离的病菌靶点后,终究得到 31 个要害作用靶点。GO 功用注释得到 312 条基因数量较大的功用注释,首要触及细胞膜、原子核、蛋白质结合、依据转录正向调控进程、信号转导进程等。KEGG 富集剖析首要触及蛋白结合通路、酶结合通路、ATP 结合通路等。阐明依据网络药理学猜测,赪桐可经过多种活性成分作用于不同靶点,并经过调控炎症反响、氧化复原反响等进程到达防治奶牛炎的意图。
吴 培1,赵宗胜1∗,何开兵2∗,朱梦婷1,南 颖1,李增强1,邵焱焱1,方晨辉1,谢梦婷1(1. 石河子大学 动物科技学院,新疆 石河子 832003;2. 新疆兵团第八师畜牧兽医工作站,新疆 石河子 832036)
要害词:我国荷斯坦奶牛;隐性炎;基因多态性;体细胞评分;多基因聚合剖析
依据截短 MOMP 蛋白的绵羊流产衣原体抗体直接 ELISA 办法的树立
刘欣钊1,2,张芳毓2,魏 天2,王成宇2,王思月2,刘 悦1,2,曲 可2,朱日宁2,鞠安琪2,马惠海2,张建峰1∗,王永志2∗(1. 吉林农业大学 生命科学学院,长春 130118;2. 吉林省农业科学院 畜牧兽医研讨所,长春 130118)
摘 要:为了树立检测绵羊流产衣原体 MOMP(main outer membrane protein)蛋白抗体的直接 ELISA办法,实验将编码 MOMP 蛋白的基因序列经密码子优化后进行基因组成,并克隆和原核表达截短蛋白,以该蛋白为抗原树立绵羊流产衣原体抗体的直接 ELISA 办法,优化该办法的反响条件,一起验证其特异性、敏感性和重复性,终究用该办法对临床待检羊血清进行检测,并与直接血凝实验试剂盒的检测成果进行比较。成果表明:截短蛋白 MOMP201~ 390 的表达、纯化作用最好。经探求,优化后的直接ELISA 办法最优反响条件:抗原包被浓度为 1 mg / L,37 ℃包被 2 h,待检血清最佳稀释度为 1 ∶100,血清和酶标二抗的最佳作用时刻别离为 45 min、60 min。树立的直接 ELISA 办法的敏感性较高,特异性和重复性较好,运用该办法从 209 份临床待检羊血清样本中检出 47 份阳性血清,与直接血凝实验试剂盒别离检测临床待检羊血清样本 86 份,总契合率为 80. 23%。阐明依据截短蛋白 MOMP201~ 390 树立的绵羊流产衣原体抗体直接 ELISA 办法可用于绵羊流产衣原体临床血清抗体的检测及流行病学查询。
刘 建,齐宝林,于洪柱,王多伽,高 阳∗(吉林省农业科学院,长春 130033)
摘 要:为了解 3 种柳枝稷(Panicum virgatum) 的耐盐碱性,实验挑选 Cave-in-Rock、Forestberg 和Pathfinder 3 种柳枝稷种类,盆栽条件下移栽至不同程度盐碱土,即轻度盐碱土(pH 值为 7. 72)、中度盐碱土(pH 值为 8. 37)及非盐碱土[空白对照(CK),pH 值为 7. 42],于移栽后第 21 天测定叶长度、叶宽度、叶面积、叶片分量、比叶面积,于成长季末测定株高、分孽数、根长、地上和地下生物量,于移栽21 d 后挑选晴天的 09:00 - 11:00 测定叶片叶绿素荧光参数[光系统Ⅱ( PSⅡ) 最大光化学功率(Fv/ Fm)、光化学淬灭系数(qP)、非光化学淬灭系数(NPQ)、PSⅡ潜在活性(Fv/ Fo)],经过主成分剖析及模糊数学从属函数法对柳枝稷幼苗期成长性状、叶片性状及叶绿素荧光参数进行归纳剖析来点评 3 种柳枝稷耐盐碱性。成果表明:除 Forestberg 的地下生物量和 Cave-in-Rock 的株高中度盐碱钳制略高于轻度盐碱钳制外( P>
0. 05),其他目标均体现为轻度盐碱钳制高于中度盐碱钳制( P>
0. 05)。柳枝稷地上生物量、分蘖数、叶长度、叶面积、叶片分量和比叶面积跟着盐碱钳制程度增大呈下降趋势。Forestberg 和 Pathfinder 的根长体现为先下降后升高,在中度盐碱钳制时最长;Forestberg和 Pathfinder 叶片的 NPQ 随盐碱钳制程度增加呈先上升后下降趋势。主成分剖析及模糊数学从属函数法归纳剖析 3 种柳枝稷耐盐碱性, Forestberg 的耐盐碱性优于其他两种柳枝稷种类。阐明Forestberg 可作为吉林省中西部区域退化牧场中度退化草地修正推行牧草种类。
要害词:柳枝稷;盐碱钳制;叶绿素荧光参数;模糊数学从属函数剖析;主成分剖析
沈 城1,陈 斌1,马 升1,魏言正2,张志通2,韩 营2,喻 琪2,张洪才1,徐建雄1∗(1. 上海交通大学 农业与生物学院,上海 200240;2. 光亮农牧科技有限公司上海崇明分公司,上海 202179)
摘 要:为了了解发酵金针菇菇根对保育猪出产功能、免疫功能和抗氧化功能的影响,实验将 96 头 52 日龄“杜梅”保育猪随机分为 4 组,别离为对照组,1%、2%、3%菇根增加组,每组 3 个重复(3 圈),每个重复 8头。对照组饲喂根底日粮,1%、2%、3%菇根增加组饲喂增加 1%、2%和 3%的发酵金针菇菇根的根底日粮,实验期为 4 周。实验第 28 天称重,核算日增重、日采食量、料重等到腹泻率,搜集血样检测免疫功能目标和抗氧化功能目标。成果表明:1%、2%、3%菇根增加组的日增重、日采食量、料重等到腹泻率与对照组比较均差异不显着(P>
0. 05),增加发酵金针菇菇根对保育猪成长功能没有显着改进作用;但 1%、2%、3%菇根增加组的免疫球蛋白 M(IgM)、免疫球蛋白 G(IgG)、免疫球蛋白 A(IgA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化才能(T-AOC)均显着高于对照组(P
摘 要:为了讨论不同来历和剂量的 β-葡聚糖(BG)对小鼠体重和首要器官安排病理学的影响,实验将 70 只小鼠随机分为对照组、20 mg / kg 酵母 BG 组、50 mg / kg 酵母 BG 组、20 mg / kg 细菌 BG 组、50 mg / kg 细菌 BG 组、20 mg / kg 藻类 BG 组和 50 mg / kg 藻类 BG 组,每组 10 只。对照组灌胃生理盐水,其他各 BG 组每天别离灌胃相应来历和剂量的 BG,接连 14 d。期间记载小鼠的临床症状,于第14 天处死小鼠,搜集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、十二指肠、空肠和回肠,进行 H. E. 染色并查询安排病理学改变。成果表明:实验第 14 天,除 50 mg / kg 细菌 BG 组外,其他各 BG 组小鼠体重均极显着低于对照组(P
孙国结,王毛毛,王 燕,张梦圆,杨慧莹,刘雨然,高嘉豪,邵永斌∗,谷新利∗(石河子大学 动物科技学院,新疆 石河子 832003)
摘 要:为了研讨不同剂量益母草碱对大鼠的抗凝血作用,挑选出抗凝血作用最佳的剂量,为进一步医治血瘀引起的相关动物疾病供给理论依据,实验将 50 只 SD 大鼠[男女不限,体重(200±20)g]随机分为空白对照组、益母草碱低剂量组(15 mg / kg)、益母草碱中剂量组(30 mg / kg)、益母草碱高剂量组(60 mg / kg)和阳性对照组(丹参滴丸),每组 10 只,灌胃给药 7 d,第 8 天腹主动脉采血,测定大鼠的凝血酶原时刻(PT)、活化部分凝血酶原时刻(APTT)、凝血酶时刻(TT)及纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体、凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)和血栓调理蛋白(TM)含量等目标。成果表明:与空白对照组比较,益母草碱低剂量组的 PT 显着延伸(P
要害词:益母草碱;SD 大鼠;凝血四项;D-二聚体;凝血酶抗凝血酶复合物;血栓调理蛋白
贾仲昕1,2,赵佳男2,季 芳2,王 雪2,李 刚2,王承民2∗,秦建华1∗(1. 河北农业大学 动物医学院,河北 保定 071000;2. 广东省科学院 动物研讨所广东省动物维护与资源运用要点实验室/ 广东省野生动物维护与运用公共实验室,广州 510260)
摘 要:为了取得高产中性蛋白酶芽孢杆菌菌株,实验从不同环境样本中别离细菌并进行 16S rDNA序列判定,运用酪蛋白琼脂培育基对产蛋白酶菌株进行初筛、福林酚法检测中性蛋白酶活性,结合形状学和分子生物学判定对高产中性蛋白酶芽孢杆菌菌株进行分类判定,经过对培育时刻、温度和 pH值的调理,研讨该菌株的酶学性质。成果表明:成功挑选出 1 株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)A1,该菌株具有较强产中性蛋白酶才能,中性蛋白酶活性为 31. 40 U/ mL,所产中性蛋白酶的最适反响温度为 50 ℃ 、最适 pH 值为 7,在 pH 值 = 6 ~ 8 时稳定性较好,对碱性环境有必定的耐受性,5. 0 mmol / L 的 Ca2+和 Mn2+对中性蛋白酶活性有显着促进作用(P
朱春灏,王艳萍,赵玉坤,张文倩,曾维斌∗(石河子大学 动物科技学院,新疆 石河子 832003)
摘 要:为了取得纯度较高的驴皮成纤维细胞并树立成纤维细胞特征判定办法,实验选用安排块贴壁法进行原代细胞培育,用胰蛋白酶联合安排块进行差时消化法别离、纯化成纤维细胞,并经过细胞形状查询、PCR 扩增判定 vimentin、免疫荧光染色法判定别离的细胞并核算纯度,用 CCK-8 法检测细胞增殖才能,台盼蓝染色检测冻存前后的细胞活率。成果表明:别离纯化后的细胞呈梭形或纺锤形,具有典型的成纤维细胞形状;PCR 扩增可明晰检测到 vimentin 的表达条带;细胞免疫荧光显现 vimentin染色为阳性,DAPI 核染呈椭圆形,以上办法均判定为成纤维细胞;体外培育的驴皮第 3 代成纤维细胞48 h 后进入对数成长期,其成长曲线呈“S”型;冻存前和复苏后细胞活率差异不显着(P>
0. 05)。阐明经体外别离、纯化成功取得了驴皮成纤维细胞。
许丹丹,张敬文,张健鹏,王长法,刘∗(聊城大学,山东 聊城 252000)
摘 要:为了取得驴源马疱疹病毒 8 型 ORF72 基因编码的糖蛋白 D(glycoprotein D,gD)和多克隆抗体,实验依据 GenBank 上发布的 EHV-8 gD 基因序列,规划了特异性引物,运用 PCR 办法扩增得到首要抗原区和跨膜区片段共 960 bp,并构建 pET-32a-gD960 原核表达载体。将重组质粒 pET-32agD960 转化至 E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,经 IPTG 诱导并优化表达,取得 gD 重组蛋白,运用SDS-PAGE 和 Western-blot 剖析判定表达产品。运用包容体蛋白纯化试剂盒纯化 gD 重组蛋白,并免疫小鼠,共免疫 3 次,每次距离 2 周。三免 2 周后,经过 Western-blot 对鼠抗 EHV-8 gD 多克隆抗体进行判定,并运用直接 ELISA 测定其效价。成果表明:实验成功构建 EHV-8 gD960 基因表达载体并取得 gD 重组蛋白,gD 重组蛋白分子质量约为 65 ku,与预期巨细相符,且特异性杰出。小鼠血清中鼠抗 EHV-8 gD960 多克隆抗体效价为 1 ∶ 16 000,该多克隆抗体能够与 EHV-8 gD960 蛋白产生免疫反响。阐明成功表达了 EHV-8 gD960 重组蛋白并制备了多克隆抗体,多克隆抗体的效价较高,免疫原性较好。